Единица хранения коллекции

Каталожный номер: HSCC00070
Название: CYTO-CAR-YT-Lact
Авторы: Горчаков А.А., Кулемзин С.В., Беловежец Т.Н., Чикаев А.Н., Коваль О.А.; Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН
Проверка контаминации: бактерии, грибы и микоплазма не обнаружены
Кариотип: 4n=92, XXYY, пределы изменчивости по числу хромосом 84-98, полиплоиды 12%, модальное число хромосом 92
Дополнительные характеристики: линия клеток передана в коллекцию для депонирования
Жизнеспособность после криоконсервации (%): 19
Контроль видовой изменчивости: кариологический
Пассаж криоконсервации: 13
Эффективность клонирования (%): 20
Область применения: иммунология, онкология
Туморогенность: да
Происхождение
Вид организма: human
Ткань: NK-cells
Описание: Модифицированная NK-клеточная лимфома, получена на базе NK-клеточной лимфомы YT путем лентивирусной интеграции кассет кодирующих химерный антигенный рецептор со специфичностью к белку человека PSMA и пептид RL2 (лактаптин). Кроме того, проведено генетическое редактирование, затрагивающее 12 хромосому и проводящее к повышению цитотоксичности клеток.
Морфология
Описание: суспензионные клетки, при активации способны к умеренному образованию колоний по 3-8 клеток. Форма индивидуальных клеток от сферической, до умеренно неправильной
Изображение
Имя файла: ICG_SB_RAS_CELL_212_fig_2.jpg
Описание изображения: Участок ДНК интегрировавший в геном — с 5'LTR по 3'LTR. Cодержит сильный конститутивный промотор гена EF1a человека, последовательность, кодирующую сигнальный пептид легкой цепи иммуноглобулина каппа, слитую с последовательностью, кодирующей химерный антигенный рецептор со специфичностью к белку человека PSMA. Далее IRES-элемент кардиовируса А с последовательностью, кодирующей ген устойчивости к антибиотику зеоцин.
Скачать
Имя файла: ICG_SB_RAS_CELL_212_fig_1.jpg
Описание изображения: Участок ДНК интегрировавший в геном — с 5'LTR по 3'LTR. Cодержит сильный конститутивный промотор гена EF1a человека, последовательность, кодирующую сигнальный пептид люциферазы копеподы Gaussia princeps (GlucSP), слитую с последовательностью, кодирующей пептид RL2 (лактаптин), маркированный гексагистидиновым эпитопом. Далее IRES-элемент кардиовируса А с последовательностью, кодирующей маркер трансдукции или трансфекции, флуоресцентный белок copGFP копеподы Pontellina plumata.
Скачать
Культивирование
Способ культивирования: суспензионный
Среда культивирования: IMDM (glucose 4.5 g/l, L-glutamine 4mM, HEPES 25 mM, Na-Pyruvate 1mM), эмбриональная бычья сыворотка 10%, PenStrep 1%
Температура, °C: 37
Концентрация CO2, %: 5
Процедура пересева: каждые 2 дня суспендирование с пересевом 1:2
Криоконсервация. KSR, %: 0
Криоконсервация. DMSO, %: 10
Криоконсервация. FBS, %: 90
Криоконсервация. Kонцентрация клеток, млн кл./мл: 2
Дополнительная информация: линия клеток передана в коллекцию для депонирования